親和標簽抗體系列的試用裝活動來啦!!

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◆DYK標簽:DYKDDDDK


DYK標簽是識別DYKDDDDK肽鏈的單抗。可用于檢測大腸桿菌、酵母、哺乳動物細胞中表達的DYKDDDDK標簽融合蛋白。


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將表達3×DYKDDDDK標簽融合蛋白A的質粒轉染至HEK293細胞中,經過24 h培養后,隨機選取其中的克隆細胞。將選取的克隆細胞用RIPA緩沖液進行裂,對所得的細胞溶解液用Western blotting檢測。

分別用Wako(克隆號 1E6)(產品編號:018-22381)抗體和A公司抗體進行Western Blot檢測。

與A公司抗體相比,Wako(克隆號 1E6)抗體識別DYKDDDDK的特異性更高。





A公司產品和Wako產品在Western blotting檢測中的靈敏度比較


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Lane 1:293T細胞溶解液

Lane 2:瞬時表達蛋白A-DYKDDDDK的293T細胞溶解液

Lane 3:瞬時表達蛋白B-DYKDDDDK的293T細胞溶解液

封閉:含5% 脫脂奶的TBS-T、4℃,過夜

抗體反應:2 h、室溫

發光劑:ImmunoStar? LD

檢測:LAS-3000、曝光時間15 min

Wako 1E6-HRP比A公司產品有更高的靈敏度!!



◆PA標簽系統?標簽序列【GVAMPGAEDDVV】

 

● 超高親和性抗體,實現高回收率、高純度純化

● 通過樹脂再生,降低運行成本

● 在動物細胞表達系(HEK293T細胞、CHO細胞等)中,有效純化蛋白

● PA標簽系統是使用可識別肽標簽(12個氨基酸殘基)的單抗(NZ-1)。Wako開發了對應的親和性純化標簽系統。

● NZ-1單抗對PA tag具有高親和性和特異性,可應用于Western blotting、細胞流式分析、免疫組化(ICC)。

   通過免疫沉淀,可純化PA標簽融合蛋白以及樹脂再生。

● PA標簽系統,可一步純化高純度PA標簽融合蛋白。



使用案例:Western blotting


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Lane 1

一抗:抗IDH1抗體(RcMab-1), 1 μg/mL

二抗:抗大鼠IgG-HRP標簽, 1000倍稀釋

 

 Lane 2

一抗:抗PA tag抗體, 1 μg/mL

二抗:抗大鼠IgG-HRP標簽, 1000倍稀釋

 

Lane 3

一抗:抗DYKDDDDK標簽抗體, 3.5 μg/mL

二抗:抗小鼠IgG-HRP標簽, 1000倍稀釋

 

上樣量:各10 μg

曝光時間:10 min



◆6×His標簽:HHHHHH (6×His)


可用于檢測His(6×His)標簽融合蛋白。克隆號不同,識別端的特異性、應用也有所不同。



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克隆號

識別端

Western blotting

Immunoprecipitation

ELISA

產品編號

N端

C端

N端

C端

9F2

C端

ND

+++++

ND

++

-

010-21861

21-48

N端及C端

+++

++++

+++

+++

017-23211

28-75

N端及C端

++

++

+++++

+++++

014-23221



B公司產品和Wako產品各克隆號的Western blotting檢測功能比較


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N端His:HEK293T表達的6×His-Protein Z, 1×105 cells

C端His:Protein P-6×His+CHO細胞溶解液, 1×105 cells

一抗:1 μg/mL

二抗:抗小鼠IgG抗體, 5000倍稀釋液

可確認其具有比B公司產品同等甚至更高的靈敏度。



GFP tag: Green Fluorescent Protein (GFP)


  可識別Green Fluorescent Protein(GFP)的抗體。GFP是可實時檢測目標蛋白局部或細胞、細胞器中的標簽蛋白,可應用于各個研究領域。

 


c-Myc標簽:EQKLISEEDL


可識別人c-Myc 來源(410-419aa)多肽EQKLISEEDL單抗。


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抗c-Myc, 單抗(017-21871

抗體濃度:0.25 μg/mL

抗原量:對10 ng c-Myc標簽重組蛋白進行電泳操作。

用10000倍稀釋的抗小鼠IgG-HRP抗體進行檢測。



GST標簽:Glutathione-S-transferase


可識別Glutathione S-transferase(GST)單抗。

 

 

親和性標簽抗體結合瓊脂糖珠


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<使用載體量>

抗DYKDDDDK標簽抗體瓊脂糖珠(Wako): 20 μL/assay

A社 Affinity Beads: 20 μL/assay


<抗原添加量>

含DYKDDDDK標簽融合蛋白的大腸桿菌細胞裂解液20 mg/assay


<免疫沉淀條件>

4℃、3 h


<洗脫方法>

150 ug/mL DYKDDDDK肽 (產品編號:044-30951) 20 μL/assay

→ 4℃、孵化30 min

添加20 μL/assay 的2% SDS sample buffer → 煮沸5 min。


<SDS-PAGE>

樣品電泳量:10 μL


<檢測方法>

銀染法

配制可過量表達DYKDDDDK標簽融合蛋白(約19 kDa)的大腸桿菌裂解液,分別用本產品和A公司產品免疫沉淀后,用DYKDDDDK肽進行抗原洗脫。將得到的抗原樣品用SDS-PAGE分離、銀染色后,比較抗原回收率。


可確認比A公司產品具有同等甚至以上的抗原回收性能!!



◆產品列表


產品編號

產品名稱

應用

子類
克隆號

包裝
(試用)

高特異單抗

010-21861

Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody(9F2)
6×His單抗(9F2)

WB

小鼠IgG1
9F2

20 μg

014-23221

Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody(28-75)
6×His單抗(28-75)

WB,IP

小鼠IgG3?κ
28-75

20 μL

017-23211

Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody(21-48)
6×His單抗(21-48)

WB、IP、ELISA

小鼠IgG1?κ
21-48

20 μg

018-22381

Anti DYKDDDDK tag, Monoclonal AntibodyD
YKDDDK標簽單抗

WB、IP、FCM、ChIP

小鼠IgG2b
1E6

20 μg

017-21871

ANTI c-Myc, Monoclonal
Antibodyc-Myc單克隆抗體

WB、IP

小鼠IgG1
9E10

20 μg

012-20461

Anti Green Fluorescent Protein, Monoclonal Antibody (Anti GFP,   MoAb)
綠色熒光蛋白單克隆抗體

IHC

小鼠IgG2?κ
mFX73

20 μL

HRP標記單抗

014-21901

Anti c-Myc, Monoclonal Antibody, Peroxidase Conjugated
過氧化物酶標記的c-Myc單抗

WB

小鼠IgG1
9E10

10 μL

015-22391

Anti DYKDDDDK tag, Monoclonal Antibody, Peroxidase   Conjugated
過氧化物酶標記的DYKDDDK標簽單抗

WB

小鼠IgG2b
1E6

10 μL

010-23181

Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody(9C11), Peroxidase   Conjugated
抗6×His,單克隆抗體(9C11),過氧化物酶偶聯

WB

小鼠IgG1
9C11

10 μL

011-21891

Anti Glutathione S-transferase, Monoclonal Antibody, Peroxidase   Conjugated
抗谷胱甘肽S-轉移酶,單克隆抗體,過氧化物酶偶聯

WB

小鼠IgG2b
5A7

20 μL

015-25951

Anti PA tag, Rat Monoclonal Antibody, Peroxidase Conjugated
抗 PA 標簽, 大鼠 單克隆 抗體, 過氧化物酶標記

WB

大鼠IgG2a
NZ-1

20 μL

抗體結合瓊脂糖珠

012-22781

Anti DYKDDDDK tag Antibody Beads
抗DYKDDDDK標簽抗體瓊脂糖珠

IP

小鼠IgG2b
1E6

200 μL

019-23391

Anti 6×Histidine Antibody Beads
抗6×His抗體瓊脂糖珠

IP

小鼠IgG3?κ
28-75

400 μL

014-23081

Anti HA Antibody Beads
抗HA抗體瓊脂糖珠

IP

小鼠IgG1
4B2

200 μg



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